舌苔形成機(jī)制的現(xiàn)代研究進(jìn)展

近年來，國內(nèi)學(xué)者利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段對舌苔的形成進(jìn)行了廣泛的研究，例如舌苔的細(xì)胞形態(tài)學(xué)、正常和病理舌苔的電子顯微鏡研究、舌苔生物化學(xué)、苔色變化、舌質(zhì)微循環(huán)、血液流變學(xué)、免疫學(xué)以及舌苔脫落細(xì)胞、舌苔與正常菌群、溶菌酶等。研究發(fā)現(xiàn)，舌苔形成與表皮生長因子以及舌苔上皮細(xì)胞中的促凋基因Bax、Fas、TGF-β3等有關(guān)。并且，舌苔的形成還與神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)有關(guān)。1形態(tài)學(xué)研究 對舌苔的形態(tài)學(xué)研究包括生理、病理狀態(tài)下從定性到定量的研究。健康人正常舌苔薄白苔由絲狀乳頭分化的角化樹與填充其間的脫落上皮細(xì)胞、唾液、細(xì)菌、食物碎屑、滲出的白細(xì)胞等組成。厚苔的形成與舌上皮增殖加速、細(xì)胞退化延遲、剝脫減慢等密切相關(guān)。而剝苔是由于體內(nèi)各種原因?qū)е律嗌掀そ琴|(zhì)化過程發(fā)生障礙，缺乏次級乳頭以及表面細(xì)胞黏著力減低而形成的一種特殊舌象。正常人舌苔脫落細(xì)胞代謝處于相對平衡狀態(tài)，在細(xì)胞形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為角化細(xì)胞居多，而完全角化細(xì)胞、角化前細(xì)胞相對較少，幾乎沒有中層細(xì)胞。在病理狀態(tài)下，舌苔脫落細(xì)胞有相應(yīng)的形態(tài)學(xué)改變。王莉等研究發(fā)現(xiàn)，厚苔脫落細(xì)胞涂片背景多較雜亂，角化細(xì)胞、白細(xì)胞、細(xì)菌明顯增多；而剝苔則背景多較清晰，上皮細(xì)胞、白細(xì)胞數(shù)量減少，有時(shí)可見到較多中層細(xì)胞，并且發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的角化程度及分布與苔色關(guān)系不明顯。楊振江等發(fā)現(xiàn)食管癌患者中薄白苔脫落細(xì)胞以角化前細(xì)胞增多為主；黃苔脫落細(xì)胞(包括薄黃和黃膩苔)則以完全角化細(xì)胞增多為主；剝苔脫落細(xì)胞也以完全角化細(xì)胞增多為主，且亦多見中層細(xì)胞；白膩和白厚苔脫落細(xì)胞則角化前和完全角化細(xì)胞均增多。微核是染色體受損后的斷片或有絲分裂后期滯后的染色體。周璇等對正?？谇火つゎa部、舌背、舌腹三個(gè)部位進(jìn)行的脫落細(xì)胞微核計(jì)數(shù)的分析表明，舌背細(xì)胞的角化程度高，完全角化細(xì)胞相對較多，且位于上皮的表層，抵抗各種外界刺激，保護(hù)下層細(xì)胞，因而有核的不全角化細(xì)胞、角化前細(xì)胞等受到的局部刺激及染色體損傷相對較少，反映在微核數(shù)上就偏低。為了避免在對各類細(xì)胞觀察中的主觀性，提高舌苔脫落細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究的客觀性，建立舌苔脫落細(xì)胞形態(tài)計(jì)量參數(shù)變化的量化標(biāo)準(zhǔn)，張平等對正常人舌脫落上皮細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)計(jì)量學(xué)檢測，獲得了正常人舌脫落細(xì)胞中不同細(xì)胞的形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)及總體細(xì)胞形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)值的頻率分布圖，使量化的細(xì)胞形態(tài)特征具體化，便于直觀比較，為今后對舌象變化的脫落細(xì)胞機(jī)理研究打下基礎(chǔ)。進(jìn)一步的比較研究發(fā)現(xiàn)，黃膩苔脫落細(xì)胞的平均面積、周長、等效直徑及最大直徑均小于正常舌苔脫落細(xì)胞，且前者的總體細(xì)胞中面積或最大直徑不同的細(xì)胞比例發(fā)生了明顯變化，認(rèn)為黃膩苔脫落細(xì)胞外形與正常舌苔相似，而直徑、面積較小的細(xì)胞增多，直徑、面積較大的細(xì)胞減少，從而導(dǎo)致其平均面積和平均直徑減小。2生物化學(xué)研究 研究舌苔脫落細(xì)胞的生物化學(xué)特征對揭示舌苔的形成機(jī)制及舌苔的臨床病理意義有著重要作用。舌上皮細(xì)胞代謝旺盛，角化層細(xì)胞及時(shí)脫落，即表現(xiàn)為正常的薄潤舌苔。如果代謝異常，或增強(qiáng)或減弱，角化層細(xì)胞就會(huì)角化不全或脫落延遲，附著于舌背表面即形成異常厚苔。舌上皮細(xì)胞的分裂、分化、移行與細(xì)胞角化脫落之間的動(dòng)態(tài)平衡及口腔pH值改變是舌苔消長變化的重要因素。袁肇凱對健康人薄白苔和患者薄苔、厚苔、剝苔舌脫落細(xì)胞、舌面酸堿度進(jìn)行檢測，結(jié)果健康薄白苔組和病理薄苔組舌面pH值呈中性或弱堿性，而病理厚苔組和剝苔組則呈偏酸性，尤以剝苔組患者明顯。在病理?xiàng)l件下，口腔細(xì)菌過度繁殖，造成酸性環(huán)境，致細(xì)胞間的黏著力增強(qiáng)，阻礙了角化上皮細(xì)胞的正常脫落，故舌苔增厚；酸度增加到一定水平，還會(huì)同時(shí)影響舌上皮血液供應(yīng)，致使舌上皮細(xì)胞營養(yǎng)代謝障礙，細(xì)胞角化受阻，從而過早變性、壞死，導(dǎo)致舌苔剝落。細(xì)胞內(nèi)含有大量與代謝相關(guān)的大分子物質(zhì)和酶，通過對其含量的測定分析，可以了解各種舌苔脫落細(xì)胞的代謝水平，間接地反映機(jī)體的生理狀況，具有較好的客觀性。吳正治等利用細(xì)胞化學(xué)的方法對常見舌苔的舌上皮細(xì)胞內(nèi)7種成分進(jìn)行分析的結(jié)果提示，舌苔正常時(shí)舌上皮細(xì)胞的新陳代謝較旺盛，這種旺盛的代謝狀態(tài)與cAMP、cGMP有關(guān)，也與唾液皮質(zhì)醇水平、鐵鋅元素含量及pH值有關(guān)。在上述研究的基礎(chǔ)上，李新華等運(yùn)用顯微分光光度技術(shù)，對病理白苔、黃苔與正常舌苔舌上皮細(xì)胞內(nèi)7項(xiàng)化學(xué)指標(biāo)的含量按辨證分型進(jìn)行了比較，結(jié)果病理白苔組細(xì)胞內(nèi)氧化水平低下，細(xì)胞分化、退化和溶解相對緩慢，病理黃苔組舌上皮的生物氧化處于亢進(jìn)狀態(tài)，白苔、黃苔有各自不同的細(xì)胞學(xué)變化特點(diǎn)，并與辨證結(jié)果基本一致。3血液流變學(xué) 血液流變學(xué)指標(biāo)異常與病理舌苔的形成有關(guān)。劉夕茹觀察高黏滯血癥(HVS)的血液流變學(xué)特征與舌診的關(guān)系，結(jié)果，復(fù)合性HVS較單純性HVS異常舌苔出現(xiàn)機(jī)率增加，治療后隨著血液流變學(xué)指標(biāo)改善，舌苔也部分好轉(zhuǎn)。從而說明異常舌象的發(fā)生，可由一個(gè)或多個(gè)黏滯因素協(xié)同為患。4舌苔脫落細(xì)胞成熟指數(shù)、成熟價(jià)值研究 舌苔脫落細(xì)胞成熟指數(shù)(MI)和成熟價(jià)值(MV)作為舌苔脫落細(xì)胞的病理生理學(xué)指標(biāo)，能反映舌苔上皮細(xì)胞的成熟情況和舌苔的病理狀態(tài)。在對小兒舌苔脫落細(xì)胞進(jìn)行的MV、MI以及其它評估中發(fā)現(xiàn)，正常組各項(xiàng)指數(shù)均高于疾病組，正常組以表層細(xì)胞為主，疾病組則中層細(xì)胞增多，且MV明顯低于正常組。疾病組中呼吸道感染組各項(xiàng)指數(shù)均明顯高于腸炎組，但隨著感染加重各項(xiàng)指數(shù)降低，與腸炎組相近。因而認(rèn)為小兒患病時(shí)其舌上皮細(xì)胞的成熟受到明顯影響。李燦東等對不同系統(tǒng)疾病患者和健康對照者舌印片進(jìn)行脫落細(xì)胞學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，各疾病組舌印片的MI、MV等指標(biāo)與對照組間有非常顯著的差異，主要表現(xiàn)為疾病組中層細(xì)胞增多，MV減小，胃腸道疾病組和泌尿系統(tǒng)疾病組MI、MV改變最為明顯。紫暗舌及膩苔、剝苔的MV、MI變化最為顯著，而且疾病組淡紅舌、薄白苔的MV、MI明顯低于對照組。因此認(rèn)為這兩項(xiàng)指標(biāo)的變化可以作為舌診綜合研究的指標(biāo)之一。進(jìn)一步觀察發(fā)現(xiàn)，慢性萎縮性胃炎脾虛濕蘊(yùn)型患者的舌脫落細(xì)胞表層細(xì)胞MI、MV均明顯低于正常組，表明慢性萎縮性胃炎患者的舌上皮細(xì)胞成熟受到明顯的影響。5表皮生長因子研究 現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，舌苔的增厚與表皮生長因子(EGF)的增加有關(guān)，EGF可以明顯促進(jìn)上皮細(xì)胞的角化。對腫瘤患者舌苔變化與EGF關(guān)系的研究中發(fā)現(xiàn)，舌苔的厚薄與唾液中EGF的含量有關(guān)。為進(jìn)一步了解EGF影響舌苔形成的機(jī)制，周坤福等通過皮下注射EGF觀察小鼠舌上皮細(xì)胞生長和EGF-R的表達(dá)。結(jié)果提示，EGF是消化道分泌的一種能影響舌苔形成的因子，通過EGF-R機(jī)制影響舌苔形成。舌黏膜上皮為復(fù)層扁平(鱗狀)上皮，可分為基底細(xì)胞層、棘細(xì)胞層和表層三種結(jié)構(gòu)。每一細(xì)胞增殖周期包括Gl期、S期、G2期、M期，細(xì)胞在正常情況下沿著上述路線運(yùn)行。陸平成等采用熒光標(biāo)記單克隆抗體流式細(xì)胞儀測定方法，探討EGF促進(jìn)舌苔增厚的機(jī)理。結(jié)果表明，EGF可以促進(jìn)細(xì)胞角蛋白的表達(dá)。舌苔的厚薄與舌上皮細(xì)胞的角化有關(guān)，一般光剝少苔之舌，角化細(xì)胞及不全角化細(xì)胞均減少，外基底層細(xì)胞或中間細(xì)胞的比數(shù)則增多，而舌苔厚者，涂片上一般角化細(xì)胞及不全角化細(xì)胞的比數(shù)較大。現(xiàn)代研究表明，EGF可以明顯促進(jìn)上皮細(xì)胞的角化，這可能是腫瘤患者舌苔厚薄與唾液中EGF含量高低呈正相關(guān)的原因之一，EGF的增加與舌苔的增厚有關(guān)。是否可以利用舌苔來進(jìn)一步判斷腫瘤的預(yù)后，值得深入研究。6神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò) 吳正治等測定了七種舌苔的植物神經(jīng)平衡指數(shù)(該指數(shù)值愈大提示交感神經(jīng)系統(tǒng)愈活躍)，結(jié)果顯示，各類舌苔的平衡指數(shù)按病理虛寒薄白、正常、薄黃、白厚、花剝依次增加，說明舌苔的變化與植物神經(jīng)平衡狀態(tài)有關(guān)。尤昭玲等檢測婦女舌苔脫落細(xì)胞的LDH在月經(jīng)周期不同時(shí)相中的動(dòng)態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)月經(jīng)后期LDH活性變化曲線明顯偏移，認(rèn)為舌苔細(xì)胞LDH特殊曲線變化與雌激素水平不足、功能失調(diào)有關(guān)。李新華等觀察了六種舌苔患者的紅細(xì)胞免疫功能及淋巴細(xì)胞酸性-α-醋酸萘酯酶(L-ANAE)活性，結(jié)果，除黃苔組外各組紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率(RCR)均顯著低于正常組，虛寒薄白苔組免疫復(fù)合物花環(huán)率(RICR)顯著低于正常組，各組L-ANAE顯著低于正常組，表明RCR、RICR、L-ANAE可以作為舌診(尤其是虛寒薄白苔)的客觀指標(biāo)之一。7細(xì)胞凋亡研究 細(xì)胞凋亡是維持機(jī)體正常生理功能和自身穩(wěn)定的重要手段，與個(gè)體發(fā)育、免疫及多種疾病有關(guān)，參與機(jī)體多種生理、病理過程，如胚胎發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)、衰老過程、腫瘤發(fā)生等。舌苔厚度與細(xì)胞凋亡指數(shù)(即凋亡細(xì)胞占所有細(xì)胞百分比)有一定關(guān)系。在復(fù)層扁平上皮中，上皮角質(zhì)形成細(xì)胞通過調(diào)節(jié)其增殖、分化、凋亡的過程來維持表皮結(jié)構(gòu)的動(dòng)態(tài)平衡。劉文蘭等發(fā)現(xiàn)，絲狀乳頭復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞在終末分化過程中部分細(xì)胞發(fā)生凋亡，表明舌苔厚度與細(xì)胞凋亡指數(shù)有一定關(guān)系。在急性呼吸系統(tǒng)感染疾病患者中，中等厚度舌苔者細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著大于其它厚度舌苔者。認(rèn)為舌苔中等厚度時(shí)，患者狀況處于一個(gè)相對穩(wěn)定的狀態(tài)，在此階段機(jī)體力爭調(diào)動(dòng)自身力量來恢復(fù)正常平衡穩(wěn)定的狀態(tài)。在中等厚度以上舌苔組，雖然凋亡細(xì)胞的絕對數(shù)量增多，但由于此階段體溫很高，基底細(xì)胞增生活躍占優(yōu)勢，細(xì)胞總數(shù)量明顯增加，從而使細(xì)胞凋亡指數(shù)降低，甚至略低于薄苔。從而認(rèn)為，祛邪中藥使舌苔由厚變薄，可能是通過誘導(dǎo)舌苔細(xì)胞的凋亡而起作用的。8促凋亡基因研究 近年來，隨著運(yùn)用細(xì)胞凋亡理論對舌苔變化機(jī)理研究的深入，發(fā)現(xiàn)正常表皮細(xì)胞依靠生長、分化、凋亡處于相對平衡的狀態(tài)而維持生理功能。細(xì)胞凋亡是由基因控制的細(xì)胞主動(dòng)死亡過程，目前發(fā)現(xiàn)與上皮組織有關(guān)的促凋亡基因有TGF-β、Fas、Bcl-2、Bax等。TGF-β是一類多效能細(xì)胞因子，在人體內(nèi)有TGF-βl、TGF-β2、TGF-β3三種同源異構(gòu)體，其中TGF-β1和TGF-β2在表皮基底層附近表達(dá)較豐富，TGF-β3在顆粒層表達(dá)較多，TGF-β促進(jìn)上皮細(xì)胞凋亡，對其生長、分化起負(fù)調(diào)節(jié)作用，可將細(xì)胞阻抑于細(xì)胞周期Gl期。Fas介導(dǎo)的凋亡過程對維持上皮正常生理功能及皮膚損傷修復(fù)等方面有重要的作用。Bcl-2是原癌基因的一種，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明它可抑制多種因子激發(fā)的細(xì)胞凋亡，延長細(xì)胞壽命，但不能刺激細(xì)胞增殖。Bax與Bcl-2各自可形成同源二聚體，也可相互作用為異源二聚體，兩者之間的比例決定細(xì)胞的命運(yùn)。當(dāng)細(xì)胞中Bax蛋白高表達(dá)時(shí)形成同源二聚體，可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，當(dāng)Bcl-2蛋白高表達(dá)時(shí)則形成Bcl-2／Bax異二聚體，抑制細(xì)胞凋亡。吳正治等運(yùn)用TUNEL技術(shù)檢測舌苔上皮細(xì)胞凋亡情況，以及運(yùn)用原位核酸分子雜交、免疫組織化學(xué)技術(shù)對凋亡相關(guān)基因Bax、Fas、TGF-β3在正常及常見病理舌苔上皮細(xì)胞中的mRNA轉(zhuǎn)錄水平及蛋白產(chǎn)物進(jìn)行測定，結(jié)果提示，凋亡相關(guān)基因Bax、Fas、TGF-β3表達(dá)水平的變化可能是影響舌苔上皮細(xì)胞凋亡并導(dǎo)致舌苔厚度變化的重要原因。9結(jié)語 舌苔形成機(jī)制的現(xiàn)代研究主要集中體現(xiàn)在細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞生化兩方面，以進(jìn)一步揭示其與臨床診斷、治療的內(nèi)在聯(lián)系。隨著科技的發(fā)展，舌診的研究正向著客觀化、微觀化方向發(fā)展。目前從多個(gè)層次上對舌苔形成機(jī)制的探索，已深入到亞細(xì)胞和細(xì)胞代謝水平，在基因分子水平研究舌苔原理已有所突破，必隨著分子生物學(xué)的發(fā)展而深入。目前研究的方法日趨多樣化，手段更加先進(jìn)，以避免研究中可能存在的某些主觀臆測性。從細(xì)胞凋亡、酶的代謝、細(xì)胞微核計(jì)數(shù)、細(xì)胞因子、激素調(diào)控等方面繼續(xù)深入研究，將有助于舌診的客觀化、定量化、標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化。摘自：《國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊》文/陳 群 徐志偉 武哲麗 鐘鴻