ATP生物發(fā)光法微生物速測技術(shù)研究獲突破

針對目前食品安全監(jiān)測以及檢驗檢疫部門對微生物快速檢測的需求，ATP生物發(fā)光法微生物數(shù)量快速測定技術(shù)由廣東省微生物研究所攻關(guān)完成，這一被列為廣東省重點科技攻關(guān)的項目近期通過了由廣東省科技廳組織的成果鑒定。

據(jù)介紹，微生物數(shù)量檢測是微生物分析檢測中的重要項目，傳統(tǒng)的方法需進行長時間微生物培養(yǎng)，檢測周期長，檢測條件要求較高，不能滿足食品、藥品及化妝品企業(yè)進行生產(chǎn)質(zhì)量控制以及出入境檢驗檢疫、質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督和疾病控制等部門進行環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)督現(xiàn)場檢測的要求。目前，這一問題已經(jīng)成為微生物分析檢測中存在的關(guān)鍵性難題。而ATP生物發(fā)光檢測技術(shù)，利用細菌的ATP作為熒光素酶催化發(fā)光的必需底物，且與發(fā)光強度呈線性關(guān)系這一原理，對微生物數(shù)量進行快速檢測。其過程無需培養(yǎng)，操作簡便、靈敏度高，在短時間內(nèi)即可得到檢測結(jié)果，是目前檢測微生物最快的方法之一。

據(jù)科研人員介紹，該成果從篩選和優(yōu)化細胞ATP釋放劑著手，通過微生物細胞ATP的釋放機理研究，成功地解除了ATP釋放劑對發(fā)光測定體系的抑制作用，篩選和組合出微生物細胞ATP釋放劑，實現(xiàn)了微生物細胞ATP的有效提取，建立了較為成熟和完善的微生物細胞ATP提取技術(shù)；成功地采用以焦磷酸酶為主要成分的非目標(biāo)細胞ATP消除劑AE、測定條件優(yōu)化、相關(guān)性分析和抗干擾及快速檢測技術(shù)ATP集成研究，摸索出合適的測定體系，確立了檢測限達102～103cells／ml的生物發(fā)光微生物數(shù)量快速測定技術(shù)，顯著提高了檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度；將ATP生物發(fā)光技術(shù)和抗干擾生物培養(yǎng)技術(shù)進行有機集成，發(fā)明了ATP生物發(fā)光法微生物數(shù)量抗干擾快速測定技術(shù)，細菌、酵母及霉菌可分別在12、24、36小時內(nèi)完成檢測，檢測靈敏度與常規(guī)方法比較，檢測時間縮短2／3，靈敏度提高30～100倍，適于低菌數(shù)樣品檢測；建立了樣品前處理技術(shù)和樣品對發(fā)光系統(tǒng)抑制的消除方法，將ATP生物發(fā)光快速檢測技術(shù)應(yīng)用于飲用水藻類環(huán)境微生物及食品微生物數(shù)量的快速檢測，整個檢測過程可控制在30分鐘內(nèi)，顯著提高了檢測效率；首次將ATP生物發(fā)光法應(yīng)用于消毒殺菌劑效果評估，并建立了非目標(biāo)細胞ATP的消除方法，評估時間由傳統(tǒng)的7～10天縮短到1～3小時，提高了評估效率。

據(jù)了解，該成果正在開發(fā)的配套發(fā)光檢測試劑盒和發(fā)光檢測儀，為實現(xiàn)ATP生物發(fā)光微生物快速檢測技術(shù)的大規(guī)模應(yīng)用打下良好的基礎(chǔ)。

專家鑒定認為，該成果總體技術(shù)達到國內(nèi)領(lǐng)先水平，部分技術(shù)達到國際先進水平。成果不但在目前具有較大的市場前景，而且是今后這一領(lǐng)域的發(fā)展方向，建議進一步加強實際應(yīng)用中的影響因素評估與研究，以滿足市場的需求。