我國建立首株HCC-7721/VCR細胞系

我國建立首株HCC-7721/VCR細胞系

——比現(xiàn)有同類細胞系耐藥性有大幅提高

2006年01月19日 近日，空軍總醫(yī)院肝膽外科張希東主治醫(yī)師等在《第四軍醫(yī)大學學報》發(fā)表研究論文，報告他們采用長春新堿（VCR）大劑量間歇誘導法，首次在國內(nèi)成功建立一株具有耐藥細胞的基本生物學特性的耐長春新堿人肝癌細胞系HCC-7721/VCR。經(jīng)檢索，目前國內(nèi)尚無同類成果報道。這一研究成果，為學術(shù)界從分子水平研究肝癌細胞多藥耐藥（MDR）機制，建立了堅實的實驗基礎。

據(jù)介紹，臨床許多腫瘤患者在經(jīng)歷化療之后，腫瘤細胞對藥物產(chǎn)生多藥耐藥。目前認為，這種多藥耐藥性的產(chǎn)生，主要與以下機制有關：（1）發(fā)生在細胞膜水平的藥物攝取減少和外排增多，引起細胞內(nèi)藥物的絕對濃度降低；（2）發(fā)生在細胞質(zhì)和細胞器水平的藥物亞細胞分布改變，使藥物無法作用靶點；（3）藥物靶點的質(zhì)和量改變；（4）細胞解毒系統(tǒng)功能增強。但以上機制多見于血液系統(tǒng)腫瘤，對實體瘤的多藥耐藥則難以完全解釋。肝癌是化療敏感性最差的惡性實體瘤，它具有抗腫瘤藥物天然耐藥和化療中繼發(fā)性耐藥特性。因此，建立穩(wěn)定的肝癌細胞系，是研究肝癌特殊耐藥機制的前提和基礎。

近年來，研究人員采用長春新堿(抗腫瘤藥物)大劑量間歇誘導法，通過體外對肝癌HCC-7721細胞株的培養(yǎng)建模、倍增時間測定及藥物敏感試驗等程序和手段，成功建立起一株耐長春新堿人肝癌細胞系HCC-7721/VCR。該細胞系經(jīng)鑒定，HCC-7721/VCR細胞系較HCC-7721細胞株的長春新堿半數(shù)致死亡濃度(IC50)增大了4.15倍；對多種化療藥物如5-氟尿嘧啶(5-FU)、絲裂霉素(MMC)、順鉑(CDDP)、阿霉素（ADB）均產(chǎn)生耐藥，其耐藥性提高了2~4倍。在生長曲線檢測中發(fā)現(xiàn)，HCC-7721/VCR細胞系的倍增時間為373小時，其耐藥倍增時間延長是HCC-7721細胞株的3.9倍。同時還發(fā)現(xiàn)，其細胞系增殖速度減慢與HCC-7721細胞株相比，有顯著性差異（P<0.01）。提示HCC-7721/VCR系是一個明確的多藥耐藥細胞模型，具有耐藥細胞系的基本生物學特性。

據(jù)張希東介紹，研究腫瘤多藥耐藥機制是腫瘤治療領域的一個熱點課題，其前提——建立穩(wěn)定的耐藥細胞系已引起人們的極大關注。目前，體外誘導腫瘤耐藥細胞系的方法有兩種：一是大劑量藥物間歇誘導法；二是藥物濃度遞增法。研究表明，大劑量藥物間歇誘導法的給藥方式與臨床化療相似，誘導的耐藥細胞長期培養(yǎng)于無藥培養(yǎng)液中，仍保持穩(wěn)定的耐藥性及細胞生物學特性，這有利于耐藥細胞系在研究應用中的穩(wěn)定性和可靠性。該研究建立的耐長春新堿人肝癌細胞系HCC-7721/VCR均具有上述特性，對于研究揭示肝癌細胞耐藥機制具有重要意義和應用前景。