方劑組分活性及配伍相關(guān)研究五年攻關(guān)結(jié)碩果

中醫(yī)藥的神奇療效人所共知，但是一提起中藥復(fù)方的藥效物質(zhì)、作用機(jī)理十有八九的人會(huì)搖頭。而這也一直是制約現(xiàn)代中醫(yī)藥獲得更大發(fā)展并走向世界的瓶頸問題。長期以來，深?yuàn)W簡約的中醫(yī)藥理論的現(xiàn)代解析是廣大中醫(yī)藥科研人員孜孜以求的目標(biāo)。

最近，“方劑組分活性跟蹤與配伍方法的建立與實(shí)踐”研究獲得2006年度國家科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)。該研究重點(diǎn)圍繞表征方劑復(fù)雜物質(zhì)、多層次評價(jià)生物活性組分、分析藥效物質(zhì)與機(jī)體環(huán)境的相互作用等緊密銜接的三個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，闡釋了中藥方劑配伍理論的科學(xué)內(nèi)涵，建立了一套中藥物質(zhì)基礎(chǔ)與活性研究的技術(shù)路線，突破了依賴臨床經(jīng)驗(yàn)研制中藥新藥的單一模式，為創(chuàng)新中藥和中藥質(zhì)量控制研究提供了新方法，是近年來中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論研究較高水平的代表。

獲獎(jiǎng)消息傳來，該課題的負(fù)責(zé)人和主要完成人、正在日本做高級訪問學(xué)者的北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院副院長李澎濤卻仍忙碌于眼前的工作。他知道，科學(xué)研究每一步的進(jìn)展都必須以枯燥、堅(jiān)實(shí)的工作為基石，“方劑組分活性跟蹤與配伍方法的建立與實(shí)踐”的成功就印證了這一真理。

挫折之后的涅槃

中藥復(fù)方的科學(xué)基礎(chǔ)研究在中醫(yī)藥學(xué)術(shù)界一直是一個(gè)頗具爭議的熱點(diǎn)。說它“熱”，是因?yàn)樗侵嗅t(yī)藥通往現(xiàn)代化道路上必須跨過的一道坎；說它頗具爭議，是因?yàn)樵谘芯糠较蚺c方法上，行業(yè)內(nèi)存在多種不同的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)，并且至今也沒有一種方法取得突破性的進(jìn)展。而且，中醫(yī)藥界一直存在這樣的質(zhì)疑：大多采用植物藥研究方法的中藥復(fù)方的現(xiàn)代研究，背離了中醫(yī)藥的特色，脫離了中醫(yī)理論的指導(dǎo)，已不姓“中”。

1998年，作為核心執(zhí)筆人，李澎濤參與了“復(fù)方與證候的科學(xué)基礎(chǔ)”申報(bào)“973”計(jì)劃的全過程。然而，由于這兩個(gè)科學(xué)問題涉及的內(nèi)容十分復(fù)雜，最終沒有獲得立項(xiàng)。

挫折并沒有使課題組退縮，他們知道，正因?yàn)橹兴帍?fù)方的科學(xué)內(nèi)涵追蹤面臨種種困難，才更需要高端科研計(jì)劃的支持，而他們必須當(dāng)仁不讓地肩負(fù)起這一歷史責(zé)任。針對學(xué)術(shù)界的質(zhì)疑，作為課題組首席科學(xué)家的王永炎院士制定了“從中醫(yī)理論出發(fā)，深化科學(xué)內(nèi)涵，研究結(jié)論要回歸中醫(yī)理論”的研究戰(zhàn)略；確立了“既要為建立于實(shí)體本體論的現(xiàn)代生物科學(xué)所認(rèn)識(shí)，又要保持具有關(guān)系本體論哲學(xué)思想的中醫(yī)理論特色，從而回答行業(yè)內(nèi)的質(zhì)疑”的技術(shù)路線。

機(jī)會(huì)總是青睞有準(zhǔn)備的人。1999年，在王永炎院士、張伯禮院士的策劃與帶領(lǐng)下，課題組以方劑這一個(gè)關(guān)鍵科學(xué)問題為研究目標(biāo)的科研項(xiàng)目，終于獲得了國家“973”計(jì)劃專家委員會(huì)的支持而立項(xiàng)。

課題分解啟動(dòng)后，李澎濤承擔(dān)了子課題——“祛邪扶正方劑的研究”。而此時(shí)，擺在李澎濤面前的是這樣的現(xiàn)實(shí)：近20年來，國內(nèi)學(xué)術(shù)界在中藥復(fù)方藥效物研究、藥理實(shí)驗(yàn)方法、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等領(lǐng)域，已不同程度地取得較大進(jìn)展，但相質(zhì)關(guān)的化學(xué)研究缺乏合理的藥效導(dǎo)向，藥理研究沒有突破受體藥理研究思維的束縛。而國際上以追蹤有效成分為目標(biāo)的中藥研究雖有可能發(fā)現(xiàn)新的有效化合物，成為針對一個(gè)病理環(huán)節(jié)的高效藥物，但也必將失去中醫(yī)藥的療效優(yōu)勢。

淡泊名利做實(shí)事

2000年1月，李澎濤等以臨床療效可靠的清開靈作為模板的課題研究正式實(shí)施。他們依據(jù)腦中風(fēng)病“毒損腦絡(luò)”病機(jī)理論指導(dǎo)的腦缺血級聯(lián)反應(yīng)的多環(huán)節(jié)病理過程，設(shè)計(jì)了清開靈的藥理效應(yīng)靶點(diǎn)，并采用液相色譜－質(zhì)譜等多種先進(jìn)的化學(xué)分析分離聯(lián)用技術(shù)，以及從器官到分子基因水平的生物分析技術(shù)，以期揭示清開靈的藥效基礎(chǔ)和配伍的科學(xué)內(nèi)涵，并依此建立起一套中藥物質(zhì)基礎(chǔ)與活性研究的技術(shù)路線。

中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究的難點(diǎn)在于不同性質(zhì)的成分?jǐn)?shù)量多、結(jié)構(gòu)差異大、含量差異顯著。而要捕捉住這些存在于中藥之中的“精靈”并且確定其效應(yīng)成分，必須進(jìn)行數(shù)量龐大、艱苦繁重的基礎(chǔ)研究。這樣的工作，課題組一干就是五年。

這五年中，隨著研究的逐步深入，需要解決的問題呈現(xiàn)幾何級數(shù)增長，特別是出現(xiàn)的藥效物質(zhì)成分的新效應(yīng)，常常需要3次以上的重復(fù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，各項(xiàng)數(shù)據(jù)須反復(fù)核對。至課題驗(yàn)收時(shí)，研究的原始記錄本的總重量達(dá)到280千克，組織學(xué)切片達(dá)8萬多張。如此大量、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鞯慕Y(jié)果是，分析發(fā)現(xiàn)清開靈主要包括8類45種主要有機(jī)成分和12種無機(jī)元素，確定了對中風(fēng)病缺血損傷核心病理過程產(chǎn)生主要有益影響的有效組分，找到了導(dǎo)致清開靈注射液不良反應(yīng)的物質(zhì)。

課題組堅(jiān)定的信念、踏實(shí)的作風(fēng)如同春風(fēng)化雨，深深打動(dòng)了周圍的人，也使得他們對課題的完成給予了全力幫助。北京中醫(yī)藥大學(xué)科研中心的高級實(shí)驗(yàn)師張家俊已屆60歲，為保證測試的可靠性，親自配制試劑、測試記錄和整理數(shù)據(jù)，并徹夜工作；基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院科研中心高級實(shí)驗(yàn)師賈旭除參與動(dòng)物造模、取材等關(guān)鍵工作外，五年間獨(dú)立完成本研究及其它各項(xiàng)研究工作11萬張病理切片；北京中醫(yī)藥大學(xué)藥廠原廠長張素齋、高級工程師王積福不遺余力地根據(jù)組分篩選的需要，隨時(shí)加班做出質(zhì)量嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)制劑……

多學(xué)科聯(lián)合促創(chuàng)新

近年來，許多先進(jìn)的化學(xué)分離及鑒定技術(shù)應(yīng)用于中藥活性成分的分離純化、結(jié)構(gòu)測定及定性、定量分析，中藥實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)發(fā)展為從整體到分子水平的系統(tǒng)研究模式。然而，對于成分極其復(fù)雜的中藥復(fù)方來說，技術(shù)創(chuàng)新仍然是搞清其藥效基礎(chǔ)的重要環(huán)節(jié)。“中醫(yī)藥科研工作一定要以海納百川的胸襟，將各學(xué)科的最新成果為我所用，使之在中醫(yī)藥基本理論的指導(dǎo)下為中醫(yī)藥研究服務(wù)”，是李澎濤確立的研究策略。

在這一策略的指導(dǎo)下，李澎濤領(lǐng)導(dǎo)的研究團(tuán)隊(duì)與清華大學(xué)羅國安教授領(lǐng)導(dǎo)的研究團(tuán)隊(duì)密切協(xié)作，前者緊緊把握中醫(yī)理論和藥理方法，后者創(chuàng)新引進(jìn)了國際上最先進(jìn)的技術(shù)，二者發(fā)揮各自優(yōu)勢，創(chuàng)新了中藥成分的分析、分離技術(shù)，使得方劑的復(fù)雜構(gòu)成在一個(gè)整體環(huán)境下獲得了科學(xué)的有機(jī)還原。

他們邊摸索邊實(shí)踐，建立了多波長多指標(biāo)成分指紋圖譜測定和評價(jià)技術(shù)，解決了方劑復(fù)雜組分的同步分析難題；創(chuàng)建了依極性分段采用不同技術(shù)的指紋圖譜表征方法，解決了以水煎煮為基本提取方式的方劑組分關(guān)系研究的技術(shù)瓶頸，為配伍向組分配伍的科學(xué)轉(zhuǎn)變提供了可行方法；建立了以指紋圖譜特征信息跟蹤為手段的方劑組分配伍化學(xué)—效應(yīng)—毒性分析方法，實(shí)現(xiàn)了以減毒保效為目的的有效組分優(yōu)化配比，減少了藥效毒理實(shí)驗(yàn)次數(shù)，增強(qiáng)了多組分有機(jī)關(guān)聯(lián)分析的可靠性。

此外，李澎濤等還借鑒了信息學(xué)的成果，首次建立了基于組分－效應(yīng)關(guān)系分析的信息處理方法，提出方劑配伍的多靶點(diǎn)效應(yīng)、組分相互作用及作用環(huán)節(jié)關(guān)聯(lián)的時(shí)序效應(yīng)三位一體整合調(diào)節(jié)方式和創(chuàng)新中藥開發(fā)的實(shí)施方法；吸收西醫(yī)學(xué)最新研究成果，建立了有效組分體內(nèi)過程和以病機(jī)理論為基礎(chǔ)的多環(huán)節(jié)指標(biāo)的組分藥理學(xué)分析方法，提高了方劑有效組分配伍的君臣佐使的中醫(yī)理論內(nèi)涵。

艱苦的工作帶來的是經(jīng)得起驗(yàn)證的科學(xué)結(jié)論。正因?yàn)槿绱?，研究的階段性成果被企業(yè)所青睞。研究創(chuàng)立的多波長指紋圖譜技術(shù)被中藥制藥企業(yè)在生產(chǎn)工藝的質(zhì)量控制和新藥研發(fā)中廣泛應(yīng)用，并顯示出一定的優(yōu)勢；創(chuàng)立的以指紋圖譜特征信息跟蹤為手段的方劑組分配伍化學(xué)—效應(yīng)—毒性分析方法及有效組分配伍的中藥二次開發(fā)的技術(shù)模式，被用于6個(gè)現(xiàn)代化中藥新藥的開發(fā)，顯示了良好的安全有效性。

研究還獲得了多項(xiàng)國家“863”和“十五”攻關(guān)計(jì)劃的支持。本項(xiàng)目建立的技術(shù)方法，獲得9項(xiàng)發(fā)明專利，其中7項(xiàng)獲得實(shí)施；發(fā)表學(xué)術(shù)論文81篇，其中被SCI收錄22篇。

特別值得一提的是，該研究從藥物的相互關(guān)系、病理過程的多環(huán)節(jié)關(guān)聯(lián)效應(yīng)和自身反應(yīng)特性等整體性出發(fā)，通過逐層分析，發(fā)現(xiàn)并建立了中藥復(fù)方的多靶點(diǎn)效應(yīng)、組分相互作用及與作用環(huán)節(jié)關(guān)聯(lián)的時(shí)序效應(yīng)三位一體配伍效應(yīng)模式，不僅體現(xiàn)了方劑配伍的君、臣關(guān)系，而且能夠充分體現(xiàn)中醫(yī)學(xué)辨證觀、整體觀的理論與臨床特色，為提高中藥現(xiàn)代化發(fā)展的中醫(yī)藥理論優(yōu)勢提供了一條新途徑。

談起對未來的展望，李澎濤說：方劑的相關(guān)研究雖然取得了階段性成果，但仍將繼續(xù)下去。對于科研工作者來說，探索的道路沒有盡頭。