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日前,中山大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究所進(jìn)行的一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),從減少細(xì)胞凋亡的角度觀察并證實(shí)了中藥四逆湯保護(hù)心肌的作用,為這一中藥的作用機(jī)制提供了新說(shuō)法。
缺血/再灌注會(huì)引起心肌細(xì)胞的損傷,嚴(yán)重的損傷將導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡,以往認(rèn)為這種死亡意味著心肌細(xì)胞的永久性死亡即壞死。目前研究結(jié)果表明細(xì)胞凋亡(AP)亦為缺血/再灌注損傷導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡的重要形式。AP具有潛在的可復(fù)性,因?yàn)樗且粋€(gè)受基因調(diào)控的細(xì)胞主動(dòng)死亡過(guò)程,若能有效地控制AP相關(guān)基因的活動(dòng),那么AP就有可能受到調(diào)控。作為凋亡的第二信使,神經(jīng)酰胺在細(xì)胞凋亡的發(fā)生中起著非常重要的介導(dǎo)作用。
研究人員將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、四逆湯有效成分組。除空白對(duì)照組外,模型組和四逆湯有效成分組分別在靜脈注射生理鹽水和四逆湯有效成分(附子生物堿、甘草酸粗品、干姜油)后,用垂體后葉素制備心肌缺血模型。此后研究人員取小鼠心肌測(cè)定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,通過(guò)DNA梯(DNALadder)和Dapi熒光染色考察心肌細(xì)胞凋亡情況,通過(guò)高效薄層層析及薄層層析掃描,用隨引標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算心肌組織中神經(jīng)酰胺的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組心肌細(xì)胞有凋亡特有的DNAladder,凋亡指數(shù)和神經(jīng)酰胺含量及MDA含量均比空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01),SOD活性比空白對(duì)照組顯著降低(P<0.01);與模型組相比,四逆湯有效成分組的凋亡指數(shù)和神經(jīng)酰胺含量均顯著降低(P<0.01),SOD活性比模型組顯著升高(P<0.01);模型組神經(jīng)酰胺含量與凋亡指數(shù)和MDA含量均呈明顯正相關(guān)。說(shuō)明四逆湯有效成分可在一定程度上降低心肌缺血/再灌注時(shí)增高的心肌神經(jīng)酰胺的含量,減少心肌細(xì)胞凋亡,從而達(dá)到保護(hù)心肌的目的。
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日前,中山大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究所進(jìn)行的一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),從減少細(xì)胞凋亡的角度觀察并證實(shí)了中藥四逆湯保護(hù)心肌的作用,為這一中藥的作用機(jī)制提供了新說(shuō)法。
缺血/再灌注會(huì)引起心肌細(xì)胞的損傷,嚴(yán)重的損傷將導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡,以往認(rèn)為這種死亡意味著心肌細(xì)胞的永久性死亡即壞死。目前研究結(jié)果表明細(xì)胞凋亡(AP)亦為缺血/再灌注損傷導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡的重要形式。AP具有潛在的可復(fù)性,因?yàn)樗且粋€(gè)受基因調(diào)控的細(xì)胞主動(dòng)死亡過(guò)程,若能有效地控制AP相關(guān)基因的活動(dòng),那么AP就有可能受到調(diào)控。作為凋亡的第二信使,神經(jīng)酰胺在細(xì)胞凋亡的發(fā)生中起著非常重要的介導(dǎo)作用。
研究人員將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、四逆湯有效成分組。除空白對(duì)照組外,模型組和四逆湯有效成分組分別在靜脈注射生理鹽水和四逆湯有效成分(附子生物堿、甘草酸粗品、干姜油)后,用垂體后葉素制備心肌缺血模型。此后研究人員取小鼠心肌測(cè)定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,通過(guò)DNA梯(DNALadder)和Dapi熒光染色考察心肌細(xì)胞凋亡情況,通過(guò)高效薄層層析及薄層層析掃描,用隨引標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算心肌組織中神經(jīng)酰胺的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組心肌細(xì)胞有凋亡特有的DNAladder,凋亡指數(shù)和神經(jīng)酰胺含量及MDA含量均比空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01),SOD活性比空白對(duì)照組顯著降低(P<0.01);與模型組相比,四逆湯有效成分組的凋亡指數(shù)和神經(jīng)酰胺含量均顯著降低(P<0.01),SOD活性比模型組顯著升高(P<0.01);模型組神經(jīng)酰胺含量與凋亡指數(shù)和MDA含量均呈明顯正相關(guān)。說(shuō)明四逆湯有效成分可在一定程度上降低心肌缺血/再灌注時(shí)增高的心肌神經(jīng)酰胺的含量,減少心肌細(xì)胞凋亡,從而達(dá)到保護(hù)心肌的目的。