防治SARS中藥篩選過程全記錄（１）

作者王智民，防治SARS中藥篩選課題組成員。

中藥抗SARS篩選工作是在4月中旬開始準備的，篩選方案幾經(jīng)修改，于4月底得到了國家"863"計劃的立項支持。入選進入國家"863"計劃《治療SARS中藥篩選研究》的中藥品種是按照一定原則進行選擇的。首先，鑒于當時許多病理過程尚未知，篩選依照"三個做起"的指導原則進行--"服務臨床，從SARS治療中已經(jīng)開始使用的藥物做起；解決急需，從已經(jīng)上市的中成藥物做起；結(jié)合實際，從臨床反映出的關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)做起"。根據(jù)當時臨床上反映出的關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)--高熱、滲出、肺實變、急性呼吸窘迫癥、多臟器損傷等，選擇緩解癥狀、減輕病情、降低死亡率為突破口，進行篩選方案的設計。我們從近萬種中成藥中進行廣泛的遴選，利用中藥、化學、藥理、中醫(yī)臨床等的知識背景初步篩選出了針對不同發(fā)病時期癥狀和病理環(huán)節(jié)的100個中成藥，進而對這100種中成藥查閱國內(nèi)外研究文獻，對文獻進行分析綜合后，選擇出了65個，再結(jié)合廣東治療SARS的臨床用藥經(jīng)驗，最后確定了首期進入篩選計劃的30個中成藥的名單。篩選技術(shù)方案是經(jīng)過各方面專家的反復論證，采用與臨床病理環(huán)節(jié)相近的動物模型進行篩選的，并在"七個統(tǒng)一"的條件下開展篩選工作（"七個統(tǒng)一"即：統(tǒng)一頂層設計，統(tǒng)一目標，統(tǒng)一標準操作規(guī)程，統(tǒng)一陽性藥，統(tǒng)一結(jié)果評定方法，統(tǒng)一供試藥物、劑量、配發(fā)與管理，統(tǒng)一信息發(fā)布的方法），為中醫(yī)藥參與SARS的臨床治療提供了科學數(shù)據(jù)。進入篩選計劃的中藥品種有：清開靈注射液、魚腥草注射液、復方苦參注射液、板藍根顆粒、燈盞細辛注射液、新雪顆粒、香丹注射液、金蓮清熱顆粒、血塞通注射液、暑熱感冒沖劑、燈盞花素注射液、藿香正氣水、安宮牛黃丸、感冒清熱沖劑、生脈注射液、苦甘沖劑、川芎嗪注射液、諾迪康膠囊、羚翹解毒片、抗病毒口服液、醒腦靜注射液、清熱解毒口服液、參麥注射液、小兒清熱止咳口服液、抗感解毒片、雙黃連口服液、雙黃連粉針劑、丹參注射液、清瘟解毒片、外感風痧顆粒、安腦丸。

全部篩選研究的結(jié)果將在科技期刊上陸續(xù)報道，其中名單的前19個藥物對不同的病理環(huán)節(jié)顯示出確切的療效。"全國防治非典指揮部"于5月22日發(fā)布了階段性研究成果，新聞發(fā)布時選擇了療效更好的前8個中藥品種進行了發(fā)布。現(xiàn)將這8個發(fā)布品種的相關(guān)資料和信息與中醫(yī)藥同行分享，并給出相關(guān)的科技文獻，供大家參閱。

一、清開靈注射液

處方：板藍根、金銀花、梔子、水牛角、珍珠母、黃芩苷、膽酸、豬去氧膽酸。

清開靈作為解熱抗菌抗病毒藥物在臨床也已應用多年，其療效是確實的。以《中國期刊網(wǎng)》為主要文獻檢索來源，對1994～2003年間在國內(nèi)核心期刊上發(fā)表的有關(guān)清開靈注射液論文進行檢索，共檢索文獻330篇，其中有關(guān)臨床應用的報道分析綜述如下。

1．文獻分布

2．療效分析

清開靈具有確切的解熱和抗病毒效果。在所報道的應用于肺炎等呼吸道疾病中總有效率在80%～95%之間。此外，該藥還用于各種原因引起的腦功能障礙，如昏迷。這也是近年來臨床應用的一個新的趨勢--此對于SARS中高熱伴有意識障礙的病例更為適用。如文獻中報導治療肺部感染所致昏迷的肺性腦病，有較好的療效。一般用藥后1～2天熱退，呼吸困難等癥狀、體征消失。臨床報道多數(shù)設有對照組，所使用的藥物為青霉素合病毒唑。

3．使用劑量及療程

規(guī)格：10ml/支，2ml/支。成人用量1～2ml/kg/d。小兒用量為10～50ml/次，3～7天/療程。一般建議劑量為成人每天不超過30ml。

4．體內(nèi)過程

以主要有效成分黃芩苷為指標顯示，清開靈注射液單次給藥后家兔體內(nèi)t1/2α6.87±1.49分鐘，t1/2β308.1±87.4分鐘。MRT（平均注留時間）為96.4±27.3分鐘。

5．不良反應

過敏性休克，藥物性皮炎，喉頭水腫，胃腸道反應，血管神經(jīng)性水腫，急性左心衰。清開靈注射液劑量過大（30～40ml/次）易致外周血白細胞下降，一般在藥后2～3天出現(xiàn)。如用藥量在20～30ml/次之間，則無白細胞下降，同時療效不減。

6．配伍禁忌：

（1）配伍以300ml體積為宜，臨時配制，在2小時內(nèi)使用完畢。

（2）與頭孢唑啉鈉配伍有影響，與頭孢拉定、頭孢呋新、頭孢哌酮鈉、頭孢噻肟鈉配伍無明顯影響。

（3）與硫酸卡那霉素和維生素B6合用，產(chǎn)生混濁。與青霉素、鹽酸林可霉素、維生素C合用可使清開靈注射液中黃芩苷含量下降。

（4）禁止與硫酸妥布霉素配伍。

（5）與下列5種喹諾酮類藥物配伍出現(xiàn)混濁：

乳酸環(huán)丙沙星注射液（江西東亞藥業(yè)有限責任公司，2000011121）

氧氟沙星注射液（江西東亞藥業(yè)有限責任公司，2000010822）

洛美沙星注射液（安徽蚌埠新一制藥廠，000122.102）

氟羅沙星注射液（保定濟世生物藥業(yè)有限公司，990801）

培氟沙星注射液（白求恩醫(yī)科大學制藥廠，990439）

（6）小諾新霉素配伍禁忌。

（7）清開靈注射液2ml加入生理鹽水100ml，微粒明顯增加，建議使用帶終端濾器的一次性輸液器。

7．主要生產(chǎn)廠家及產(chǎn)品

北京中醫(yī)藥大學實驗藥廠，地壇牌清開靈注射液，10ml/支。

石家莊神威藥業(yè)股份有限公司，神威牌清開靈注射液，2ml/支。

山西太行制藥廠，太行牌清開靈注射液，10ml/支。

8．研究用樣品的生產(chǎn)廠家的確定

考慮到該產(chǎn)品具有一定的副反應，因此，我們選擇時制定了（1）必須具有較好的GMP條件，能夠滿足臨床大量應用的生產(chǎn)能力；（2）必須是大型企業(yè)；（3）有可供研究用的樣品這三條為選藥原則。因此我們選擇了石家莊神威藥業(yè)股份有限公司、北京中醫(yī)藥大學實驗藥廠作為研究用樣品。

9．篩選結(jié)論

清開靈注射液分別在流感病毒性肺炎、內(nèi)毒素吸入性肺炎、全氟異丁烯（PFIB）性肺損傷、2個肺細胞炎性損傷、內(nèi)毒素致熱、多臟器衰竭（DOMS）、急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）、急性肺纖維化模型進行實驗，結(jié)果證明清開靈注射液均顯示出了較好的效果。

二、魚腥草注射液

1．處方：魚腥草，為鮮魚腥草經(jīng)加工制成的滅菌水溶液

2．研究用樣品的生產(chǎn)企業(yè)：福建三愛藥業(yè)股份有限公司

3．入選依據(jù)

魚腥草注射液具有清熱解毒、利濕的功能，主治肺膿瘍，痰熱咳嗽，白帶，尿路感染，癰癤。作為退熱、抗病毒藥物在臨床也已應用多年，其療效是確實的。該藥物在廣東治療SARS的臨床已經(jīng)應用，我們也以《中國期刊網(wǎng)》為主要文獻檢索來源，對1998～2002年間在國內(nèi)核心期刊上發(fā)表的有關(guān)魚腥草注射液論文進行檢索，有關(guān)臨床應用的報道見參考文獻。

主要有抗菌，增強機體免疫功能，抗過敏和平喘等作用。

體外抑菌實驗表明，魚腥草素對卡他球菌、流感桿菌、肺炎球菌、金黃色葡萄球菌等均有明顯的抑制作用。對多種革蘭氏陽性及陰性細菌都具有明顯的抑制作用，以金黃色葡萄球菌及其耐青霉素株（最低抑菌濃度為62.5～80μg/ml）、肺炎雙球菌、甲型鏈球菌、流感桿菌（最低抑菌濃度為1.25μg/ml）為敏感；卡他球菌、傷寒桿菌等次之；而大腸桿菌、綠膿桿菌及痢疾桿菌不甚敏感；對白色念珠菌、新型隱球菌、孢子絲菌、曲菌、著色霉菌、紅色癬菌、疊瓦癬菌、石膏樣小孢子菌、鐵銹色小孢菌、鯊癬菌等也具有抑制作用。其最低抑菌濃度為2mg/ml。魚腥草的乙醚提取物對結(jié)核桿菌有明顯的抑制作用．在普拜二氏培養(yǎng)基中，其最低抑菌濃度為1：32000，在血清中的最低抑菌濃度為1：2000，對于尾靜脈感染結(jié)核桿菌H37RV株之動物，能延長生存時間、降低死亡率，但肺部病變僅有輕度減輕。魚腥草素在普拜氏液體培養(yǎng)基上對結(jié)核桿菌H37RV株的最低抑菌濃度為16μg/ml。魚腥草素及揮發(fā)油與甲氧芐氨嘧啶（TMP）配伍作用對比試驗結(jié)果表明，魚腥草素與TMP配伍有協(xié)同作用，抑菌作用顯著增強，魚腥草揮發(fā)油與TMP有拮抗作用，魚腥草揮發(fā)油能降低TMP的抑菌作用，但二者配伍能增強抗副傷寒及宋內(nèi)氏痢疾桿菌的作用。也有報道，魚腥草注射液在體外試驗中，對大腸桿菌、短小芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、藤黃八疊球菌等均無抗菌作用，在體內(nèi)試驗中，對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌感染的小鼠，均無保護作用。

4．不良反應

臨床應用肌注時，少數(shù)病人有局部疼痛；陰道內(nèi)給藥時，個別病例出現(xiàn)陰道充血。上述反應在停藥后均消失。臨床應用個別也有引起大皰性表皮松解萎縮型皮炎或藥疹、過敏性紫癜、過敏性休克乃至死亡。

5．篩選結(jié)論

魚腥草注射液分別在流感病毒性肺炎、內(nèi)毒素吸入性肺炎、2個肺細胞炎性損傷、內(nèi)毒素致熱和多臟器衰竭（DOMS）模型上進行了驗證，其對肺部各種炎性模型的效果較為滿意，但對多臟器衰竭模型未顯示出效果。

三、復方苦參注射液

1.處方：苦參、白土苓。

2.研究用樣品的生產(chǎn)企業(yè)：山西金晶藥業(yè)有限公司

3.入選依據(jù)

該注射液的主要化學成分為氧化苦參堿、苦參堿、槐果堿、苦參黃酮、土茯苓皂苷等。具有清熱利濕，涼血解毒，散結(jié)止痛的功能。針對復方苦參注射液共發(fā)表論文21篇。

巖舒注射液臨床報道胸膜腔內(nèi)注入巖舒注射液80ml治療10例癌性胸水，4周后復查胸片、B超觀察胸水情況，總有效率80%；還報道42例惡性腹水，在化學藥物無效的情況下，用巖舒注射液60ml腹腔注射治療，效果較好，總有效率在75%以上。用本品（含苦參等、山西金晶藥業(yè)生產(chǎn)）20ml、PDD40mg、IL-270萬單位，每周1次；對照組用PDD40mg、IL-220萬單位，每周1次。療效標準：完全緩解：胸水消滅至少維持1個月以上。部分緩解：胸水減少50%以上，維持1個月。穩(wěn)定：胸水減少不足50%。無效：胸水未減少或增加。結(jié)果：兩組分別完全緩解10、8例，部分緩解7、6例，穩(wěn)定1、3例，無效2、3例，總有效率85%、70%。結(jié)論：本品清熱利濕，殺蟲利尿，有良好的抗腫瘤作用。

注射液中所含氧化苦參堿、苦參堿的有關(guān)報道從1984～2003年共457篇。臨床報道具有胸腔內(nèi)注射治療惡性胸水、肺纖維化、肝炎、癌癥的作用。

氧化苦參堿、苦參堿等的抗炎作用與氫化考的松相似，能對抗巴豆油、角叉菜膠（大鼠）和冰醋酸（小鼠）誘發(fā)的滲出性炎癥。對大鼠由棉球誘發(fā)的慢性炎癥無效，其抗急性炎癥與垂體-腎上腺系統(tǒng)無關(guān)，管內(nèi)實驗證明是直接抑制炎癥反應。實驗觀察到肌肉注射氧化苦參堿具有明顯延長小鼠異體游離心肌存活期的作用，并具有量效關(guān)系。

對移植和非移植小鼠的脾臟淋巴細胞轉(zhuǎn)化和免疫球蛋白分泌細胞影響的研究結(jié)果顯示，移植術(shù)后10d小鼠體外脾臟細胞自發(fā)增殖增強，對刀豆蛋白A刺激的轉(zhuǎn)化反應則明顯減弱。氧化苦參堿可顯著抑制正常小鼠的脾細胞的自發(fā)增殖及對刀豆蛋白A或脂多糖刺激的轉(zhuǎn)化反應，而對手術(shù)已使之顯著降低的脾細胞對刀豆蛋白A刺激的轉(zhuǎn)化反應無影響。這種選擇性抑制作用可能利于避免用其他常規(guī)非特異免疫抑制劑所帶來的危害。

以1％二硝基氯苯乙醇致敏豚鼠建立了實驗性接觸性皮炎動物模型，3天后，實驗組肌注苦參素1/7LD50致死量，一周后觀察，實驗組8只豚鼠中僅有一只皮膚有紅斑、充血及脫屑，空白對照組8只豚鼠7只皮膚有紅斑、充血及脫屑。兩組紅斑發(fā)生率有顯著差異（P＜0.05）。組織切片兩組動物表層細胞內(nèi)水腫的細胞數(shù)差異有顯著性（P＜0.01），而炎癥細胞浸潤程度，兩組差異無顯著性。

注射液（40ml/次/日）具有非常明顯的消除癌癥腹水的作用，較強的鎮(zhèn)痛，特別是閾前鎮(zhèn)痛的確切作用，抗炎、退熱作用，對于SARS治療中的肺實變，肺纖維化可能會具有較好的作用。

本品具有較好的安全性。急性毒性：小鼠靜脈注射LD50：12.14g/kg,腹腔注射LD50：27.8g/kg,肌肉注射最大耐受量為80g/kg,是臨床用量的300倍。大鼠的2個月長期毒性研究表明：注射給藥大（21.2g/kg）、中（5.2g/kg）、小（2.6g/kg）三個劑量組的各個臟器（心，肝，脾、肺、腎、胃、十二指腸、腎上腺、睪丸、卵巢、輸卵管）均沒有出現(xiàn)任何異常，未見明顯的病變，與對照組相比，沒有顯著性差異。1個半月的犬長毒，大（12g/kg），中（4.8g/kg）、?。?.6g/kg）靜脈給藥，結(jié)果：大、中劑量均出現(xiàn)了明顯的植物神經(jīng)系統(tǒng)的反應，表現(xiàn)流涎癥狀，但此癥狀為一時性的，大劑量的流涎在30分鐘消失，中劑量在15分鐘消失，癥狀較輕；除了大劑量2只犬腎組織中出現(xiàn)輕度蛋白外，其它各組犬的病理檢查未見異常情況。

4．不良反應：本品無明顯全身毒副反應，局部使用有輕度刺激，但吸收良好。

5．篩選結(jié)論

復方苦參注射液在內(nèi)毒素吸入性肺炎、全氟異丁烯性肺損傷、2個肺細胞炎性損傷、多臟器衰竭模型進行實驗，結(jié)果其對多臟器衰竭的效果較為突出，并顯示較好的抗纖維化作用，對全氟異丁烯性肺損傷未顯示出效果。