雌激素受體和絕經的研究進展

摘要：雌激素受體（ER）是一類有配體激活的核轉錄因子，介導大部分的雌激素反應。研究ER的作用機制，有助于深入了解雌激素的不用靶器官效應。近年來，有關雌激素受體的報道層出不窮，尤其是兩種受體亞型的組織學定位及其與婦科內分泌的關系，已普遍認為ER廣泛存在于體內多個器官、與絕經期及絕經后相關疾病有著密切的關系。本文綜述了雌激素受體兩種受體亞型ERα和ERβ及其與絕經相關疾病的研究進展。

自從發(fā)現了雌激素受體（ER），對其組織學定位、表達、功能及與絕經相關疾病關系的研究就不斷深入，近些年來取得了重要進展。ERα和ERβ廣泛存在于兩性生殖器官、心、腦、骨、腎等組織。雌激素結合后在不同器官發(fā)揮特異的作用?，F就ER的結構、分布、功能及ER與絕經相關疾病關系的研究進展做一綜述。1ER

1.1ER的亞型和結構

以前ER的研究僅限于ERα，直到1996年，分別從人類和大鼠前列腺組織中分離出與雌激素有高度親和力的受體ERβ，從此對ER的分子生物學研究進入了一個新階段。

Enmark等發(fā)現人類ERβ基因位于14q22-24處；ERα基因在6號染色體。ERβ基因遠小于ERα，前者約40kb，后者為140kb，因內含子長度不同所致。ERα蛋白含595個氨基酸，ERβ蛋白含530個氨基酸，分子量為59.2kD，為核受體超家族成員。受體分6個結構域，從N端至C端分別為A-F，其受體蛋白分4個功能域，轉錄激活功能域：對應于A/B段及E/F段；兩處分別命名為AF-1和AF-2；DNA結合域（DBD）：對應于C段；配基結合域（LBD）：亦對應于E/F段；受體蛋白變構過程中的鉸鏈區(qū)對應于D段、人類兩種ER

1.2ER的組織分布和功能

1.2.1泌尿生殖器官

用RT－PCR和免疫組化方法在人和大鼠的泌尿生殖道均可檢測到ERα和ERβmR NA及其蛋白質；原位雜交顯示輸卵管、子宮、陰道上皮以表達ERα為主，ERβ表達微弱；卵巢以表達ERβ為主[1],大部分存在于顆粒細胞，這說明在卵泡生長和成熟的調節(jié)過程中主要是ERβ介導了雌激素的活性。

ERα敲除的雌性鼠（ERαknockout,ERKO）不能受孕，子宮對雌二醇治療無反應，卵巢含出血卵泡。ERβ敲除的雌性鼠（ERβkockout,BERKO）已經生育了下一代的BERKO雌性鼠，幼鼠似乎在卵泡發(fā)育和排卵方面受到影響，雌性BERKO鼠子宮與 ERKO鼠比較解剖上似乎是正常的。雌性ERKO鼠雌二醇含量提高了10倍，黃體生成素和卵泡刺激素含量也增加，可以看出ERα調節(jié)著血清雌激素水平，推測BERKO鼠有正?；驇缀跽５拇萍に睾蚅H/FSH含量。在異位子宮內膜組織的上皮細胞和間質細胞中均有兩種ERmRNA表達。

1.2.2心血管系統和骨

血管平滑肌細胞主要表達ERβ，ERα表達微弱[2]。實驗證明，雌激素能抑制無ERα基因小鼠的血管損傷反應，說明雌激素通過ERβ抑制血管增生。ER存在于成骨細胞和破骨細胞，在鼠成骨細胞和骨肉瘤中有ERβmRNA。大量文獻報告了雌激素對絕經后婦女骨質疏松的作用。

缺乏ERα的男性病人伴有低的骨密度，并且持續(xù)的線性增長，用雌激素治療后骨密度無改變。芳香化酶缺乏的男性和女性病人也存在上述現象，但用雌激素治療后骨密度增加。據此推測ERα在骨的發(fā)育、成熟和礦物質沉積方面起重要作用；Sims NA[3]等研究發(fā)現，在男性，僅有ERα參與調節(jié)骨重建，而在女性，兩種受體亞型相互補償，共同調節(jié)此過程。

對BERKO鼠研究發(fā)現，BERKO雌性鼠相對于野生型鼠增加了皮質骨形成，成年雌性BERKO鼠骨小梁有較高的礦物質含量，顯示ERβ在成年雌性鼠中與骨小梁的調節(jié)有關，認為ERβ抵抗了ERα 在骨形成中的刺激作用[4]。

1.2.3中樞神經系統

大量有關ERβ的研究提示ERβ主要分布于下丘腦、視前區(qū)、小腦扁桃體、中腦水管、海馬CA1區(qū)等區(qū)域，在許多區(qū)域ERα和ERβ共同存在。但在CA1區(qū)和齒狀回E Rα的分布很少。最近研究[5]表明，雌激素與大腦的學習、記憶、情感以及運動協調功能有關。

2ER和絕經相關疾病

圍絕經期婦女，由于卵巢功能逐漸降低，體內雌激素水平降低，常出現更年期癥狀，包括月經紊亂，精神、神經癥狀如潮熱、出汗、精神過敏、情緒不穩(wěn)定等，泌尿生殖道萎縮，心血管系統的變化和骨質疏松，嚴重影響絕經后婦女的生存質量。Zofkova I[6]等研究發(fā)現,ER基因型不僅在受體水平且在激素合成水平上決定性腺系統的功能，而這種關系的病理遺傳學在絕經相關疾病如骨質疏松中的作用尚未明確。研究ER和相關疾病的關系為絕經相關疾病的預防治療提供了理論依據。

2.1ER和絕經后生殖道疾病

研究表明：陰道組織的ERα、β表達在絕經前和絕經后有明顯差別，ERβ在絕經期明顯降低，不管其是否接受HRT[7]。

Jazaeri AA等用RT-PCR和免疫印跡法對絕經前后子宮內膜的ERα/βmRNA做了分析，結果示絕經前（4.9）和絕經后（27.3）有顯著差異，這主要是因為絕經后ERβ表達降低所致。而絕經后內膜癌患者的ERα 下降明顯[8]。近來研究發(fā)現，ER基因多態(tài)性可能與絕經后某些不甚明確的癥狀有關。

2.2ER與絕經后心血管疾病

婦女絕經后的心血管病的發(fā)病率為絕經前的2-3倍。絕經后婦女應用雌激素補充療法使心血管病的發(fā)生率明顯下降。提示雌激素對心血管具有保護作用。雌激素是通過與血管壁上特異的雌激素受體結合,影響特異蛋白質的DNA合成，調節(jié)血管平滑肌細胞和內皮細胞的許多功能,影響血管的收縮、舒張，發(fā)揮其特有的生物效應。雌激素可通過改善脂代謝,降低總膽固醇和低密度脂蛋白(LDL),增加高密度脂蛋白(HDL)的含量,其引起的血脂變化,可能對冠狀動脈粥樣硬化起到一定防止作用。而近10多年來許多學者通過雌激素與男性冠心病的臨床對照研究,認為高雌激素血癥可能是男性冠心病的危險因素。

對ER的功能研究發(fā)現無動脈粥樣硬化的停經前婦女冠狀動脈ER表達高于患有動脈粥樣硬化的婦女。最近也證明了羊中ER的活化增加了冠脈血流和心輸出量。

Ros enson等用隨機、雙盲設計原則，檢測了23位（三組）絕經后婦女血漿粘滯度，一組單用雌激素，另一組雌孕激素合用，還有一組對照；結果單用雌激素組的血漿粘滯度明顯低于雌孕激素合用組（P<0.05）。而血漿粘滯度的增加是心血管疾病的發(fā)生和慢性心臟病患者死亡的重要先兆，進而提示雌激素與ER結合后可能降低絕經后婦女血漿粘滯度以減少心血管病危險性。去卵巢2個月后大鼠主動脈的ER表達顯著減少,補充雌激素或補充雌、孕激素能使去卵巢大鼠主動脈ER的含量維持在正常水平,這可能是雌激素對絕經后婦女心血管保護作用的機制之一。

2.3ER與絕經后骨質疏松

雌激素水平降低是絕經后骨質疏松發(fā)病的首要原因，老化并不是骨質疏松的主要因素。在此基礎上，Albright等首先提出雌激素可用于防治絕經后骨質疏松。

長期以來，人們一直認為雌激素對骨的作用是間接的，1988年Komm在成骨細胞上發(fā)現了ER，明確了雌激素對骨細胞的直接作用（通過ER）。1990年Penlser又在破骨細胞上發(fā)現了雌激素受體；更加證明了雌激素對骨細胞的直接作用。

王欽紅等人在2000年用DEXA、PCR-RFLP分別用測量了健康的絕經后婦女的骨密度值和ER基因PvuII酶切位點的多態(tài)性，ANOVA分析顯示，Troch部位的骨密度值與 ER基因PvuII酶切位點的多態(tài)性呈顯著相關。目前對ER基因多態(tài)性與絕經后骨丟失的關系尚需進一步驗證。小鼠實驗顯示，

(1)卵巢切除后骨量丟失可能與單核細胞表達ER量減少,使單核細胞向破骨細胞的分化增多,而使骨吸收增強有關。

(2)激素替代治療可能通過調節(jié)單核細胞數及其ER的表達而起抗骨質疏松的作用。

2.4ER和絕經后中樞神經系統疾病

神經流行病學研究結果顯示，絕經期前的女性比同年齡男性的卒中發(fā)生率低，而絕經后女性卒中發(fā)病率明顯升高。雌激素替代治療可使絕經后與卒中相關的死亡率和相對危險度下降。此外絕經后雌激素替代治療對絕經后婦女的阿爾茨海默病、絕經后抑郁、怕金森病也起到預防和保護作用。有關于雌激素的腦保護作用目前知之較少，體外細胞培養(yǎng)研究發(fā)現，雌激素的抗氧化作用優(yōu)于維生素E，且能阻斷谷氨酸的興奮毒作用和DNA變性，似與ER無關。但是，在卵巢切除后的雌性鼠下丘腦和海馬，ERβ/ERα要比切除前高，從而顯示了ERβ在調節(jié)雌激素在中樞神經系統的作用中扮演著十分重要的角色。

對不同性別、年齡的下丘腦背側視上核的ERα、β研究顯示：在核組化染色中，年輕女性AVP部位含有分泌ERβ的神經原的數目是年輕男性的50倍、年老女性的250倍。另外，在胞漿染色中，年輕女性ERβ也較男性和年老女性表達高。而對于 ERα，四組陽性神經原的數目無明顯差異，但是ERα的性別，年齡影響則與ERβ恰恰相反。此項結果首次表明了在絕經后婦女視上核精氨酸加壓素（AVP）神經原，ERβ表達明顯降低，ERα明顯升高。據此推測雌激素受體的變化可能參與了絕經后婦女AVP神經原的活性。近來發(fā)現ER兩種亞型皆存在于調節(jié)生物節(jié)律的視交叉上核[9]，提示絕經前后ER亞型的改變可能與更年期癥狀有關。

2.5其它

日本Shimizu I等研究了丙型肝炎病毒相關的肝細胞癌和絕經前后肝細胞中ER 表達的關系，發(fā)現絕經后ER降低且肝細胞癌發(fā)病率明顯升高，從而說明了女性絕經前可能通過ER防止肝細胞癌（HCC）作用[10]。:絕經后Ⅱ型糖尿病的發(fā)病可能與雌二醇及ER的下降有關。尼爾雌醇治療使絕經后患者的白細胞雌激素受體增加,可能有利于絕經期婦女免疫功能的改善。3展望

目前對ER與絕經期相關癥狀疾病的關系所知甚少，廣泛表達的ER說明其可能具有重要的生理及病理學意義，因而對ER的跨學科多范圍的研究必將成為新的熱點。例如絕經前后兩種受體亞型在性腺軸表達及對配體親和力的差異就具有重要的研究價值，它將進一步指導新型抗雌激素藥物開發(fā)，新一代的雌激素替代藥物以及雌激素受體拮抗劑將具有更高的效能、不良反應更小，可大大提高雌激素相關疾病的內分泌治療效果，改善圍絕經期婦女的生活質量。