中草藥及成方制劑顯微鑒別法介紹

顯微鑒別系指用顯微鏡對藥材的切片、粉末、解離組織或表面制片及成方制劑中藥味的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行鑒別的方法。

鑒別時選擇有代表性的樣品，根據(jù)各該藥材鑒別項的規(guī)定制片。成方制劑根據(jù)不同劑型適當(dāng)處理后制片。

一、橫切片或縱切片：選取藥材適當(dāng)部位，軟化后用徒手或滑走切片法，切成10～20μm的薄片,選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它試液處理后觀察。必要時可包埋后切片。

二、粉末制片：取粉末少量，置載玻片上，攤平，選用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它適當(dāng)試液處理后觀察。

三、表面制片：將樣品濕潤軟化后,切取一部分或撕取其表皮,加適宜的試液觀察。

四、解離組織片：如樣品中薄壁組織占大部分，木化組織少或分散存在，可用氫氧化鉀法；如果品堅硬，木化組織較多或集成較大群束，可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。在解離前，應(yīng)先將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片。

1．氫氧化鉀法

置樣品于試管中，加5％氫氧化鉀溶液適量，加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去堿液，加水洗滌后，取出少量置載玻片上，用解剖針?biāo)洪_，以稀甘油裝置觀察。

2．硝鉻酸法

置樣品于試管中,加硝鉻酸試液適量，放置，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，加水洗滌后，照1．法操作裝置。

3．氯酸鉀法

置樣品于試管中，加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量,緩緩加熱，待產(chǎn)生的氣泡漸少時，再及時加入氯酸鉀少量，以維持氣泡穩(wěn)定地發(fā)生，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，加水洗滌后，照1．法操作裝置。

五、花粉粒與孢子制片：取花粉、花藥（或小的花朵）或孢子囊群（干燥樣品浸于冰醋酸中軟化），用玻璃棒搗碎，過濾于離心管中，離心，取沉淀加新鮮配制的醋酐與硫酸(9∶1)的混合液1～3ml，置水浴上加熱2～3分鐘，離心，取沉淀，用水洗滌2次,加50％甘油與1％苯酚3～4滴,用品紅甘油膠封藏觀察。也可用水合氯醛試液裝置觀察。

六、細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的測量：在顯微鏡下測量細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的大小，可用目鏡測微尺測量。先將目鏡測微尺裝入目鏡內(nèi)，用鏡臺測微尺標(biāo)化。標(biāo)化時，轉(zhuǎn)動目鏡，移動鏡臺測微尺，使兩種量尺的刻度平行，左邊的“0”

刻度重合，再找第二條重合刻度。根據(jù)兩條重合刻度間兩種量尺的小格數(shù)，計算出目鏡測微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拇笮。é蘭）。測量時,以目鏡測微尺測量目的物的小格數(shù)，乘以每一小格的大小(μm)。通常是在高倍物鏡下進(jìn)行，但欲測量較長的如纖維、非腺毛等的長度時,則以在低倍物鏡下測量較為方便。記錄最大值與最小值（μm）,可允許有少量略高或略低于藥典規(guī)定的數(shù)值。