中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究方法與思路

中藥的發(fā)展已有幾千年的歷史，但長期以來，醫(yī)藥界多以傳統(tǒng)的經(jīng)驗判斷中藥質(zhì)量的真、偽、優(yōu)、劣，缺乏系統(tǒng)、科學(xué)的分析方法。近幾年來，藥學(xué)工作者在中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究方面做了不少工作，積累了不少寶貴的經(jīng)驗和方法，提出了許多新的思路。

1中藥材的質(zhì)量控制

長期以來，人們通過對藥材的產(chǎn)地、栽培、采收、加工、炮制等一系列環(huán)節(jié)的監(jiān)控來規(guī)范藥材質(zhì)量；重視道地藥材的生產(chǎn)。近年來，隨著西方先進(jìn)監(jiān)測手段的傳入，顯微方法：化學(xué)方法等都應(yīng)用于中藥材的檢驗。提取藥材中的單體或某幾類成分后，根據(jù)其含量來衡量藥材的質(zhì)量的方法被普遍采用。鐘國躍認(rèn)為：采用的某或某幾種有效成分的含量來作為中藥質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)的方法不夠充分、客觀，也難以為中醫(yī)藥理論所接受。如何制定既符合中醫(yī)藥理論又能為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)所接受的規(guī)范化質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，普通的思路可概括為：建立符合中醫(yī)藥理論的藥理學(xué)動物模型和藥效學(xué)評價指標(biāo)→闡明中藥作用的物質(zhì)基礎(chǔ)→建立藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的科學(xué)、先進(jìn)的定性定量檢測方法→制定中藥及中成藥規(guī)范的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。吳謙認(rèn)為：當(dāng)前動物類中藥鑒定缺乏專屬性指標(biāo)?，F(xiàn)代分類學(xué)迅速發(fā)展，蛋白質(zhì)和核酸分析可用于中藥品種的鑒定。重視分子生物學(xué)理論與技術(shù)在中藥新藥，首先是動物類中藥質(zhì)量研究中的應(yīng)用，認(rèn)為研制品種特征，蛋白質(zhì)克隆分析藥盒及定量PCR分析藥盒，是比較切實可行的近期目標(biāo)。對于中藥純凈度控制的問題，文旭認(rèn)為：主要是要除去那些不起治療作用的雜質(zhì)。提出了測控有害雜質(zhì)，包括重金屬、砷鹽、殘留農(nóng)藥、儲存及加工過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)的方法和參考限量。

2用于測量中藥成分含量的方法

中藥優(yōu)良度考察，重要的是盡量全面測定可定量的必要成分以使測定內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)與中醫(yī)藥理論相吻合。測定方法以高效液相為主，但薄層色譜法也占有重要地位，而計算光度法的價值在于內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。賴小平提出：高效毛細(xì)管電泳（HPCE）是一種發(fā)展迅速的新型分離分析技術(shù)。與常用的高效液相（HPLC）比，具有分析時間短、分離效率高、適應(yīng)性廣、檢測限低、進(jìn)樣量小、溶劑消耗少、自動化程度高等特點?？稍谥兴幉馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究和中成藥質(zhì)量研究中發(fā)揮重大作用。王寶琴報道綜合用于中藥質(zhì)量檢測的方法有：氣相色譜法，其中毛細(xì)管色譜柱在一般氣相的基礎(chǔ)上又有所發(fā)展，已廣泛應(yīng)用于揮發(fā)性成分的研究。直接蒸發(fā)-氣相色譜法，樣品不需前處理，可直接進(jìn)行分析。裂解氣相色譜法可用于各種樹脂類藥材的測定。氣相色譜/博里葉變換紅外聯(lián)用法在沒有對照品時較為有利。中草藥揮發(fā)性成分氣相色譜保留指數(shù)譜圖可用于質(zhì)量控制的研究。常用的方法還有高效波相色譜法、薄層掃描法、分光光度法、超臨界流體色譜法、指紋圖譜法、中藥化學(xué)模式識別法、高效毛細(xì)管電泳法及顯微定量法。

3最近提出有關(guān)中成藥質(zhì)控的新方法

目前，中成藥的質(zhì)按基本都局限在藥材的組織結(jié)構(gòu)顯微鑒定和某味藥材中某種單一有效成分的薄層色譜斑點定性上，雖然高效波相法得到廣泛的應(yīng)用，但也局限在單一成分定量上。些方法最大的缺點在于不能對中成藥中每味藥做出定性鑒定，而且不能判斷每味藥之間量比關(guān)系是否與處方相同。因此，從理論上設(shè)計了中成藥質(zhì)控新方法：色譜峰值定比法。只要選擇一能代表某味藥材的組分色譜峰，然后再選擇其他各味藥材代表峰，并對代表峰與標(biāo)準(zhǔn)峰比值作一限度范圍，即可對所要檢測中成藥中每味藥材做出一個較好的定性定量，以此來控制制劑的質(zhì)量。蘇薇薇認(rèn)為：中藥制劑質(zhì)量的優(yōu)劣，歸根到底在于其中的化學(xué)成分在種類分布及含量高低上存在著差異。這種差異可通過樣品的色譜反映出來。中成藥質(zhì)量的化學(xué)模式識別研究的基本息路是從色譜中提取反映樣品間質(zhì)量差異的特征，通過模式識別法對樣品進(jìn)行分類。該方法從樣品化學(xué)成分的總體差異入手去分析問題，能反映樣品質(zhì)量的本質(zhì)差異。這種方法可應(yīng)用于許多制劑，如：烏雞白鳳丸的評價。有人還將化學(xué)模式識別方法應(yīng)用到黃芩、厚樸、龍膽草、威靈仙、大黃、人參、牡丹友等中藥材的研究上。王義海提出一種新中成藥質(zhì)量控制分析方法：類比法。類比法不用化學(xué)對照品，而通過對各味藥測定值比值的變化達(dá)到對各味藥含量的控制，從而為中成藥質(zhì)量控制提供新途徑，并用薄層掃描法對中成藥戊己丸進(jìn)行了測試。楊松濤認(rèn)為可用模糊分析法對中藥來進(jìn)行質(zhì)量分類。其步驟為：首先把數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化，公式為；Xik=Xik－Xk）/Sk（I=1，2，……n；k＝1，2，……m）；下一步建立模糊相似矩陣；最后根據(jù)模糊矩陣R求質(zhì)量分類。并用此方法對安宮牛黃丸進(jìn)行了質(zhì)量分類。

4對中藥制劑的評價

1985年，日本厚生省（衛(wèi)生部）發(fā)出通知，為規(guī)定中成藥質(zhì)量，要求從中成藥中選出兩種以上的撝副晡鎦蕯，設(shè)定出含量規(guī)格如下：含厚樸中成藥中厚樸酚的定量；含陳皮中成藥湯液中脫氧腎上腺素的定量；含大黃中成藥湯液中番瀉甙的定量；知母及含知母中成藥中知母皂甙β-Ⅱ、知母皂式A-Ⅲ及芒果素的定量。李曉燕歸納我國1990年版《中國藥典》275種中成藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)用的檢驗方法，見表1。

顯微 顏色 薄層 氣相色 浸出物 光譜吸 含量 薄層 其他

數(shù)量 反應(yīng) 色譜 譜峰 收特征 測定 掃描

數(shù)量(種)184937836225241

%66.933.828.41.02.160.79.10.714.9

其結(jié)論為：規(guī)定進(jìn)行含量測定的少，只有25種3顏色反應(yīng)特異性不強；浸出物重量概念模糊，質(zhì)控作用不大；薄層色譜所占比例不小，但僅作為定性而不是定量分析；譜吸收特征求規(guī)定吸收峰處吸收峰的上下限；現(xiàn)代分析儀器價格昂貴，基層單位少有配置，不能用來鑒別分析中成藥；中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一，檢驗中難以執(zhí)行，某些檢驗方法經(jīng)實踐證明不適用于中成藥的含量測定。中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中還存在的一些問題，如楊曾讓認(rèn)為：對處方主藥或貴細(xì)藥材無定性檢測規(guī)定或規(guī)定不完全，或定性檢測方法缺乏特定的專屬性；主要成分明確的中成藥，一般應(yīng)規(guī)定主藥的含量測定方法，但有相當(dāng)一部分中成藥對主要或其有效成分沒有定量規(guī)定或規(guī)定不合理、不統(tǒng)一，對含有害雜質(zhì)的中成藥未在標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定有害雜質(zhì)的限量。郝近大認(rèn)為：藥材地區(qū)習(xí)用品在各地均有，且名目繁多，常因異物同名造成混亂，因而影響中成藥的質(zhì)量。針對以上情況，夏柳影認(rèn)為：中成藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)從無到有，從不完善到逐步完善，并在不斷提高。并指出中成藥成分復(fù)雜，應(yīng)充分應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的測試手段進(jìn)行研究；用藥理作用或生物測定方法控制質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)引起重視；中成藥應(yīng)考慮制定藥物溶出度和含量均勻度的檢查；首選處方中君藥、貴重藥、有毒藥制定鑒別及含量測定方法，或者對能反映內(nèi)在質(zhì)量的指標(biāo)成分建立含量測定方法；標(biāo)準(zhǔn)品和工作對照品的研究工作應(yīng)加以重視。王寶琴互認(rèn)為：首先選定項目與藥味，然后選定測定成分。有效成分或指標(biāo)成分清楚的可針對性定量；有效類別清楚的，對總成分進(jìn)行測定；所測成分應(yīng)歸屬于某單味藥；對于同藥材原料產(chǎn)地利等級不同但含量差異較大的成分，需注意檢測指標(biāo)的選定和產(chǎn)地的限定；含量過低成分不宜選??；檢測成分應(yīng)盡可能與中醫(yī)用藥的功能主治相近；中西藥結(jié)合制劑則不僅測中藥君藥含量而且需測西藥；復(fù)方制劑中一無法進(jìn)行某些成分含量測定的，可選擇適宜溶劑作浸出物測定；無法確定含量測定項目時，也可擇其君藥之一的藥材原料進(jìn)行含量測定，間接控制成藥質(zhì)量。粟道娥認(rèn)為：中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究和形成，往往只局限在成藥制劑，限制了研究思路，應(yīng)在投料原料與成品之間，建立半成品（或中間體）概念，并對其主要項目作質(zhì)量控制。這里半成品定義為：以合格原藥材，按確定的提取工藝經(jīng)提取、分離、濃縮、純化制得的，只需加入輔料即可制成劑型的提取物。孫永定認(rèn)為：中成藥質(zhì)量的保證，必須依靠對中藥原料、輔料的控制以及對中成藥生產(chǎn)制備工藝過程中質(zhì)量控制。另外，原忠提出：中藥制劑質(zhì)量可從三個方面進(jìn)行評價：①指標(biāo)性成分的選取應(yīng)滿足以下特征：溶于水，穩(wěn)定，不因煎煮而被破壞，不易揮發(fā)，專屬性強。②分析方法：高效液相是中藥制劑質(zhì)量評價中較常用的分析方法。理想的高效波相法應(yīng)具有流動相易于制備，分析時間短，樣品不需預(yù)處理，可內(nèi)標(biāo)法定量等特點。③測定結(jié)果的評價。

5小結(jié)

由于中藥的化學(xué)組成和制備工藝復(fù)雜，其穩(wěn)定性和重復(fù)性較低，給中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究造成許多障礙。另外，許多常用中藥材的化學(xué)成分尚未研究清楚，所以中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究如果照搬由單一化合物組成的西藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究方法，都將事倍功半。任何藥物的研究都是以治療疾病、為臨床服務(wù)為最終目的，因此筆者認(rèn)為，必須將藥效學(xué)指標(biāo)引入中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究中，以藥物的藥效為基準(zhǔn)進(jìn)行精制，篩選出藥效最高而化學(xué)組成最簡單的物質(zhì)作為控制其質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)，以指紋圖譜進(jìn)行定性控制。然后大力進(jìn)行質(zhì)量穩(wěn)定性和工藝可重復(fù)性的研究，這樣才能真正實現(xiàn)中藥的現(xiàn)代化，增強中藥制劑在國際醫(yī)藥市場上的競爭能力。

（暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥物研究中心，李曉光；廣州中醫(yī)藥大學(xué)，陳志霞）